استخلاص المركبات الستيرويدية الاستروجينية من نوى التمر واختبار كفاءتها البايولوجية

بان طالب الحبوبي
جامعة بغداد / كلية الزراعة / 1996
المشرفين
اميرة حسين حمرة/ جامعة بغداد / كلية الزراعة
علي عبد الرحمن العسكري / جامعة بغداد / كلية الزراعة

ان الهدف من الدراسة الحالية هو استخلاص المركبات الستيرويدية الاستروجينية من نوى التمر وتقييم واختبار الفعالية الاستروجينية لمستخلص نوى التمر مختبرياً وحيوياً وكالآتي:-

أولاً: الاستخلاص والكشف عن الاسترون :

استخدم مجروش نوى التمر من صنف الزهدي (Phoenix dactylifera L.) لغرض الاستخلاص، والذي يتلخص باجراء عملية صوبنة بمحلول 6% هيدروكسيد البوتاسيوم الايثانولية بوجود الحرارة، يليها استخلاص بواسطة الاسيتون والايثر، وأخيراً يستخلص بواسطة خلات الاثيل للحصول على مستخلص خلات الاثيل الحاوي على التيرويدات بشكلها الخام، ومن ثم كشف عن الاسترون في مستخلص خلات الاثيل بواسطة كروماتوغرافية الطبقة الرقيقة (TLC).

ثانياً: التقييم الحيوي لمستخلص نوى التمر (Bioassay) :

استخدم في هذه التجربة 32 فأرة غير ناضجة جنسياً، معدل أوزانها 10,9 ± 0,376 غرام. قسمت عشوائياً إلى 8 مجاميع، حقنت تحت الجلد كلٌّ حسب المعاملة بحقنتين يومياً وكالآتي:-
المجموعة الأولى (مجموعة السيطرة) حقنت بـ 0,5 مل/يوم بروبنيل كلايكول، المجاميع القياسية التي تضمنت 4 مجاميع وكل واحدة حقنت بأحد تراكيز بنزوات الاستراديول الأربعة 5، 10، 15، 20 مايكروغرام/يوم. وأخيراً المجاميع المعاملة بمستخلص نوى التمر وتضمنت 3 مجاميع، حقنت كل واحدة بـ 0,5 مل/يوم من أحد تراكيز مستخلص نوى التمر المخفف: الواطئ والمتوسط والعالي. هذا واستمرت التجربة لثلاثة أيام وفي اليوم الرابع خدرت الحيوانات وتم فصل الأرحام لحساب أوزانها وكانت النتائج كالآتي:-

  1. حصلت زيادة معنوية في نسبة وزن الرحم : وزن الجسم × 10 2 للمجاميع المعاملة بـ 5، 10، 15، 20 مايكروغرام بنزوات الاستراديول مقارنةً بمجموعة السيطرة، إذ بلغ متوسط النسبة المذكورة ± الخطأ القياسي 0,64 ± 0,039 و 0,88 ± 0,008 و 0,96 ± 0,020 و 1,01 ± 0,028 للمجاميع المعاملة بـ 5، 10، 15، 20 مايكروغرام بنزوات الاستراديول على التوالي مقارنةً بـ 0,29 ± 0,018 لمجموعة السيطرة وكان معامل الارتباط البسيط 0,93.
  2. حصلت زيادة معنوية في النسبة أعلاه للمجاميع المعاملة بتراكيز مختلفة من مستخلص نوى التمر مقارنةً بمجموعة السيطرة، إذ بلغ متوسط نسبة وزن الرحم للمجاميع المعاملة بالتركيز الواطئ والمتوسط والعالي من مستخلص نوى التمر 0,65 ± 0,017 و 0,75 ± 0,032 و 0,99 ± 0,018 على التوالي مقارنةً بـ 0,29 ± 0,018 لمجموعة السيطرة.

ثالثاً: التقييم الحقلي لمستخلص نوى التمر :

استخدم في هذه التجربة 10 فطائم عواسية، بعمر 6-7 أشهر ومتوسط أوزانها 12,3 ± 0,86 كغم. قُسمت عشوائياً إلى خمس مجاميع، حُقنت في العضلة بواقع حقنة واحدة يومياً كلٌّ حسب نوع المعاملة. مجموعة السيطرة حقنت بـ 0,5 مل بروبنيل كلايكول والمجموعتين القياسيتين حقنتا بـ 0,5 ، 1,0 ملغم/ يوم بنزوات الاستراديول وأخيراً المجموعتين المعاملتين بـ 0,5 ، 1,0 ملغم/ يوم مستخلص نوى التمر. هذا وجمعت عينات الدم من الوريد الداجي من كل الحيوانات حيث أخذت عينة قبل البدء بالتجربة والعينات الباقية واحدة بعد 24 ساعة من كل معاملة وأخذت آخر عينة بعد 48 ساعة من آخر حقنة لغرض تقدير مستوى هرمون الاستراديول في المصل بالطريقة المناعية الفلورية (FIA) واستمرت المعاملة ثلاثة أيام ثم ذبحت الحيوانات بعد 48 ساعة من آخر حقنة واستخرجت الأرحام بعد الذبح مباشرة لحساب أوزانها وكانت النتائج كالآتي:-

  1. لم تكن هنالك فروقات معنوية في تركيز هرمون الاستراديول في المصل قبل الحقن للمجاميع المعاملة ببنزوات الاستراديول ومجموعة السيطرة، في الوقت الذي سجل ارتفاعاً معنوياً في مستوى الهرمون بعد 24 ساعة من الحقن إذ بلغ 0,928 ± 0,131 و 4,124 ± 0,559 نانومول/ لتر في المجموعتين المعاملتين بـ 0,5 ، 1,0 ملغم بنزوات الاستراديول على التوالي، وقد حصل انخفاض غير معنوي في مستوى الهرمون بعد 48 ساعة من الحقن في المجموعتين المعاملتين ببنزوات الاستراديول بينما حصل انخفاض معنوي في مستوى الهرمون بعد 48 ساعة من قطع المعاملة إذ بلغ في المجموعتين 0,5 و 1,0 ملغم بنزوات الاستراديول 0,538 ± 0,221 و 0,967 ± 0,025 نانومول/ لتر على التوالي. هذا ولم تكن هناك فروقات معنوية في تراكيز الهرمون لمجموعة السيطرة خلال أوقات جمع العينات المختلفة. كما لم يكن للمعاملات بـ 0,5 و 1,0 ملغم مستخلص نوى التمر تأثير معنوي على مستوى هرمون الاستراديول في المصل، إذ لم يتحسس التحليل (FIA) الهرمون في المصل وكان تركيزه مشابهاً لما هو عليه في مجموعة السيطرة.
  2. حصلت زيادة معنوية في نسبة وزن الرحم : وزن الجسم × 10 5 للمجاميع المعاملة بـ 0,5 ، 1,0 ملغم بنزوات الاستراديول إذ بلغ متوسط النسبة المذكورة 34,179 ± 3,520 و 53,381 ± 8,460 على التوالي مقارنةً بـ 12,594 ± 0,074 لمجموعة السيطرة. وكان معامل الارتباط البسيط يساوي 0,95.
  3. حصلت زيادة معنوية في النسبة أعلاه للمجاميع المعاملة بـ 0,5 ، 1,0 ملغم مستخلص نوى التمر إذ بلغ متوسط نسبة وزن الرحم 19,579 ± 0,059 و 31,369 ± 0,880 على التوالي مقارنةً بـ 12,594 ± 0,074 لمجموعة السيطرة. وكان معامل الارتباط البسيط يساوي 0,99.